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同时提取DNA RNA的试剂盒----AllPrep DNA/RNA Mini Kit

luyued 发布于 2011-04-22 11:34   浏览 N 次  
以下内容转自waiting的博客,特此感谢!

研究中有时候会遇到些很珍贵的样本,希望从很小的一块组织(比如30mg)中提取DNA、RNA和蛋白,但是分成几份又不够,或者希望各个组分之间的信息更具可比性,怎么做呢?

最早尝试过Trizol的方法,仔细看protocol,确实提供了提取多个组分的方法,但是操作上实在比较困难。

Qiagen的有个Allprep的试剂盒,离心柱吸附的方法,经过前段时间的尝试,成功提取了20多个组织的RNA和DNA。RNA的纯度一如 Qiagen的RNeasy试剂盒,相当不错,得率基本上取决于组织的状况,有多有少。DNA的洗脱,除了按照protocol用100ul Elution buffer,我还加上50ul做了洗脱,第二次洗脱的浓度稍低,但纯度更好。有时候第一次洗脱的DNA会有少许蛋白污染。

Tiangen也出了个DNA/RNA/Protein共提取的试剂盒,号称是用的Qiagen的技术。拿了个20次的试用装过来,管子、柱子之类 的都比较粗糙,比较山寨。试用了一下,效果也不错,有一次平行做一个组织,液氮研磨后两等分,分别用Tiangen和Qiagen的盒子提取,居然 Tiangen提取的RNA量还多些,: (

但多做几个之后,还是有不稳定的情况出现,最后还是Qiagen的盒子提完了样本。

不过两个盒子共同的缺点是蛋白沉淀后相当难溶解,也许要加尿素or SDS之类的才能较好溶解。

使用心得撰写完毕,嗯。

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